产品简介
EZ-Luc Dual-Glow Luciferase Assay Kit是一款双报告基因检测试剂盒，具有灵敏度高、发光信号稳定的特点，可以对萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）和海肾萤光素酶（Renila luciferase）在哺乳动物细胞中的表达进行高通量检测。萤火虫荧光素酶和海肾萤光素酶可分别催化荧光素（luciferin）或腔肠素（coelenterazine）氧化形成oxyluciferin或coelenteramide，并在此过程中产生生物荧光。本试剂盒先以荧光素为底物检测萤火虫荧光素酶的活性，然后终止萤火虫荧光素酶的催化反应，并同时以腔肠素为底物检测海肾荧光素酶的活性，实现双荧光素酶报告基因检测。
EZ-Luc Dual-Glow Luciferase Assay Kit可高效地检测受特定基因的调控元件调控的luciferase的表达。通常可根据需要将转录调控元件（Promoter等）构建克隆于luciferase基因编码区的上游，或将3'-UTR调控区克隆于luciferase基因编码区的下游，与待测的上下游调控基因的质粒及Renilla luciferase质粒共转染细胞，或转染后加入相应的药物进行处理，裂解细胞并检测荧光素酶活性。通过检测荧光素酶的活性，评价调控元件受特定蛋白或药物的调控作用的强弱。其中Renilla luciferase的作用为校正转染效率的内参，以消除不同孔间细胞数和转染效率的差异。萤火虫荧光素酶催化luciferin的发光波长为560 nm，海肾荧光素酶催化coelenterazine的最强发光波长为465 nm。
产品组分
组分 | EZB-DL1-01 (100 Rxns) | EZB-DL1-02 (1000 Rxns) |
Firefly Luciferase Assay Reagent | 10 ml | 100 ml |
| Stop & Reaction Buffer | 10 ml | 100 ml |
| Renilla Luciferase Substrate (100×) | 100 ul | 1 ml |
注：对于EZB-DL1-01：足以在96孔板中进行100次assays；或384孔板中进行400次assays；对于EZB-DL1-02：足以在96孔板中进行1000次assays；或384孔板中进行4000次assays。
保存条件
本产品需用干冰运输，未拆封的试剂盒于-20°C可保存2个月，-80°C可保存1年。过期日期详见产品标签中有效期信息。配制好Renilla Luciferase Substrate工作液后，建议将其按使用需求分装并避光保存于-80°C，可稳定进行10次冻融，活性损失小于10%。
自备材料
具有发光检测（Luminescence）模块的多功能酶标仪或荧光检测仪（luminometer）、适合于发光检测的标准不透明壁多孔板（贴壁处理的无菌板，建议优先使用白色酶标板）、多孔板振板装置、单通道或者多通道移液器、水浴锅、PBS。
相关详细信息，请查看产品说明书。
