产品简介
本产品适用于从福尔马林固定的石蜡包埋组织(FFPE)中分离纯化总RNA。脱蜡过程可选择使用二甲苯,或使用本试剂盒提供无毒性的脱蜡试剂(Buffer RW)。使用本产品提取的RNA完整性好,纯度高,可用于多种下游应用,如RT-PCR、qRT-PCR等实验。
产品组分
组分 | EZB-RNF02 (50 Preps) |
Buffer RW | 55 ml |
Buffer RL1 | 8 ml |
Buffer RL2 | 12 ml |
gDNA Remover | 120 µl |
Buffer W1*1 | 6 ml |
Buffer W2*1 | 6 ml |
Buffer E | 3 ml |
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) | 50 preps |
注:*1: Buffer W1和Buffer W2首次使用前需加入瓶身标签所示体积的无水乙醇并充分混匀,并做好标记(Buffer W1和Buffer W2与无水乙醇的体积比为1:4)。
Buffer RW:去除样本中石蜡。
Buffer RL1:悬浮样本并裂解组织细胞。
Buffer RL2:提供RNA上柱缓冲环境。
Buffer W1:去除RNA中的蛋白。
Buffer W2:去除RNA中的盐离子。
Buffer E:洗脱离心柱上的RNA。
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes):吸附RNA。
保存条件
Buffer RL1和gDNA Remover务必保存在-20°C,Spin Columns for RNA (with Collection Tubes)置于室温(15 ~ 25°C)干燥条件下保存,其余组分置于4°C保存即可,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,也可在56°C水浴中预热10 min,以溶解沉淀。
产品特点
1. 纯度高、完整性好:OD260/280和OD260/230都在1.9 ~ 2.2之间。完全适用于下游实验如RT-PCR、RT-qPCR等实验。
注意事项
1. 使用本试剂盒前,请务必仔细阅读本指南,以确保操作正确。
2. Buffer W1和Buffer W2首次使用前需加入瓶身标签所示体积的无水乙醇并充分混匀后才可使用,并做好标记(Buffer W1和Buffer W2与无水乙醇的体积比为1:4)。
3. gDNA Remover建议分装保存于-20°C,反复冻融会影响其活性。
4. 提前将金属浴或水浴锅预热到56°C、60°C和90°C。
5. 建议使用前把洗脱液Buffer E分装为3 ~ 4份,以减小污染的概率;且可以取1份提前预热到60°C。
6. RNA洗脱时一定要将洗脱液Buffer E加到柱中央的膜上(如果洗脱液加到侧壁上,会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少),同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
自备材料
金属浴或水浴锅,无水乙醇、二甲苯等。
实验流程
相关详细信息,请查看产品说明书。