产品简介
本产品基于苯酚/胍的样品裂解和二氧化硅膜纯化，可从高脂肪含量的动物组织和细胞中纯化高质量的总RNA。纯化后的总RNA适用于多种下游应用，包括：RT-PCR、RT-qPCR、Northern印迹、核酸酶保护测定、poly (A)+选择后的cDNA文库制备等。
产品组分
组分 | EZB-RN001A (100 Preps) |
Lysis Buffer | 55 ml |
Wash Buffer 1*1 | 13 ml |
Wash Buffer 2*1 | 13 ml |
Elution Buffer | 10 ml |
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) | 100 Preps |
注:*1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前，请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀，加好混匀后可在瓶身做好标记。
保存条件
Lysis Buffer需2 ~ 8°C避光保存，其余组分室温保存。有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
产品特点
1. 纯度高、完整性好：OD260/280和OD260/230都在1.9 ~ 2.3之间，RNA质量可达到Aligent 2100 RNA质检的要求。完全适用于下游实验如RT-PCR、RT-qPCR、测序、文库构建、跑胶等实验。
2. 提取能力强：既可以用于多种类型组织RNA的提取（肌腱、骨骼等组织），又可以用于多种细胞RNA的提取。
3. 适用于高脂肪含量组织的 RNA提取：如脂肪，肝脏等。
4. 适用性广：不仅适用于mRNA的提取，也可用于lncRNA和circRNA的提取。
实验流程
注意事项
1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前须加入52 ml的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer 1和Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4）。
2. Elution Buffer使用前建议分装为3 ~ 4份保存，以减小污染的概率。
3. 本试剂盒中离心的过程都是在4°C的离心机中进行，其余的操作步骤都是在室温中进行，所以实验前需提前预冷离心机。
4. 本试剂盒用于组织和细胞样品的总RNA提取，及miRNA、circRNA和lncRNA的提取。
5. 样品充分裂解后，如果不打算继续进行RNA提取，可将裂解产物转移到EP管中冻存在-80°C（下次解冻后恢复到室温使用，加氯仿混匀，继续向后进行即可）。
6. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上（如果洗脱液加到侧壁上，会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少），同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
7. 若裂解产物含较多油层，可将裂解产物12000 g离心2 min，然后吸取下层的水相到另一个EP管，弃去油层，接着加入150 μl氯仿，充分混匀，室温静置3 ~ 5 min，再接着第4步往后做。
8. 关于组织用量，可参考如下表格：
组织种类 | 脂肪 | 肝脏 | 富含脂肪的组织 |
参考用量（mg） | 30 ~ 50 | 5~10
| 30 ~ 50
|
代表性实验结果
1. 用本产品从50 mg小鼠脂肪组织中提取的RNA用Nanodrop检测的结果
由图可见，用本产品提取的RNA具有很好的纯度和较高的浓度。
由上述qPCR的检测结果可见，本试剂盒能够很好的用于miRNA和lncRNA的提取。
相关详细信息，请查看产品说明书。
