产品简介
本产品基于苯酚/胍的样品裂解和二氧化硅膜纯化，可从动物组织和细胞中纯化高质量的总RNA。与EZB-RN001-plus相比，本产品提供了氯仿替代物，因此无需自备氯仿。纯化后的总RNA适用于多种下游应用，包括：RT-PCR、RT-qPCR、Northern印迹、核酸酶保护测定、poly (A)+选择后的cDNA文库制备等。
产品组分
组分 | EZB-RN4 (100 Preps) |
Lysis Buffer | 55 ml |
Buffer A | 22 ml |
Wash Buffer 1*1 | 13 ml |
Wash Buffer 2*1 | 13 ml |
Elution Buffer | 10 ml |
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) | 100 Preps |
注:*1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前，请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀，加好混匀后可在瓶身做好标记。
保存条件
Lysis Buffer和Buffer A需2 ~ 8°C避光保存，其余的组分室温保存（注：Buffer A在4°C保存时会出现结晶或冻结现象，仅需在使用前置于室温融化后使用即可，不影响使用）。有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
产品特点
1. 纯度高、完整性好：OD260/280和OD260/230都在1.9 ~ 2.3之间，RNA质量可达到Aligent 2100 RNA质检的要求。完全适用于下游实验如RT-PCR、RT-qPCR、测序、cDNA文库构建、跑胶等实验。
2. 提取能力强：既可以用于多种类型组织RNA的提取（肌腱、骨骼等组织），又可以用于多种细胞RNA的提取。
3. 适用性广：不仅适用于mRNA的提取，也可用于lncRNA和circRNA的提取。
4. 所需样品少：最低可提取2万细胞或者1 mg组织的RNA。
实验流程
注意事项
1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前，分别加入52 ml的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer 1和Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4）,并在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。
2. Elution Buffer使用前建议分装为3 ~ 4份保存（留一管在室温备用，其余的可冻存于-20°C），以防污染。
3. 本试剂盒可用于组织和细胞样品的总RNA及lncRNA的提取。
4. 建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞，培养至细胞密度达到80%以上时进行RNA提取，不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA，否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。
5. 本试剂盒中离心的过程都是在4°C的离心机中进行，其余的操作步骤都是在室温中进行，实验前需提前预冷离心机。
6. 样品充分裂解后，如果不打算继续进行RNA提取，可将裂解产物转移到EP管中冻存在-80°C，下次解冻后恢复到室温使用，加Buffer A混匀，继续向后进行即可。
7. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上（如果洗脱液加到侧壁上，会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少），同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
8. 如果提取高脂肪含量组织（例如肝脏、脂肪组织）的RNA，则建议使用货号为“EZB-RN001A”的RNA提取试剂盒,以获得更好的纯度。
9.关于组织用量，可参考如下表格：
组织种类 | 肿瘤、胚胎、心、肾、脾、胰脏、肺、眼 | 肌肉、皮肤、血管 |
参考用量（mg） | 5 ~ 50 | 20 ~ 50 |
代表性实验结果
1. 用本试剂盒从30 mg小鼠肌肉组织中提取的RNA用Nanodrop检测的结果
由左图可知，用本试剂盒提取的RNA具有很好的纯度和较高的浓度。
右图：琼脂糖凝胶电泳检测的结果（取5 ul上样）。M: 250 bp DNA Ladder，Lane 1为TRIzol（Invitrogen）方法提取的RNA；Lane 2为本试剂盒提取的RNA。由图可知：本试剂盒提取RNA的得率明显高于TRIzol方法。
2. 本试剂盒用于提取lncRNA的qPCR测试结果请见下图
由上述qPCR的检测结果可见，本试剂盒能够很好的用于lncRNA的提取。
相关详细信息，请查看产品说明书。
