Universal RNA Purification Kit (EZB-RN4)

Universal RNA Purification Kit (EZB-RN4)

产品类型:RNA提取

货号:EZB-RN4

规格:100 Preps

价格: 询价

产品简介

    本产品基于苯酚/胍的样品裂解和二氧化硅膜纯化,可从动物组织和细胞中纯化高质量的总RNA。与EZB-RN001-plus相比,本产品提供了氯仿替代物,因此无需自备氯仿。纯化后的总RNA适用于多种下游应用,包括:RT-PCR、RT-qPCR、Northern印迹、核酸酶保护测定、poly (A)+选择后的cDNA文库制备等。

产品组分

组分

EZB-RN4 (100 Preps)

Lysis Buffer

55 ml

Buffer A

22 ml

Wash Buffer 1*1

13 ml

Wash Buffer 2*1

13 ml

Elution Buffer

10 ml

Spin Columns for RNA (with Collection Tubes)

100 Preps

注:*1. Wash Buffer 1Wash Buffer 2首次使用前,请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀,加好混匀后可在瓶身做好标记。

保存条件

Lysis BufferBuffer A2 ~ 8°C避光保存,其余的组分室温保存(注:Buffer A4°C保存时会出现结晶或冻结现象,仅需在使用前置于室温融化后使用即可,不影响使用)。有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。

产品特点

1.  纯度高、完整性好OD260/280OD260/230都在1.9 ~ 2.3之间,RNA质量可达到Aligent 2100 RNA质检的要求。完全适用于下游实验如RT-PCR、RT-qPCR、测序、cDNA文库构建、跑胶等实验。

2.  提取能力强:既可以用于多种类型组织RNA的提取(肌腱、骨骼等组织),又可以用于多种细胞RNA的提取。

3.  适用性广:不仅适用于mRNA的提取,也可用于lncRNAcircRNA的提取。

4.  所需样品少:最低可提取2万细胞或者1 mg组织的RNA

实验流程

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注意事项

1. Wash Buffer 1Wash Buffer 2首次使用前,分别加入52 ml的无水乙醇并充分混匀(Wash Buffer 1Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4),并在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。

2. Elution Buffer使用前建议分装为3 ~ 4份保存(留一管在室温备用,其余的可冻存于-20°C),以防污染。

3. 本试剂盒可用于组织和细胞样品的总RNAlncRNA的提取。

4. 建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞,培养至细胞密度达到80%以上时进行RNA提取,不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA,否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。

5. 本试剂盒中离心的过程都是在4°C的离心机中进行,其余的操作步骤都是在室温中进行,实验前需提前预冷离心机。

6. 样品充分裂解后,如果不打算继续进行RNA提取,可将裂解产物转移到EP管中冻存在-80°C,下次解冻后恢复到室温使用,加Buffer A混匀,继续向后进行即可。

7. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上(如果洗脱液加到侧壁上,会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少),同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。

8. 如果提取高脂肪含量组织(例如肝脏、脂肪组织)的RNA,则建议使用货号为“EZB-RN001A”的RNA提取试剂盒,以获得更好的纯度。 

9.关于组织用量,可参考如下表格:

组织种类

肿瘤、胚胎、心、肾、脾、胰脏、肺、眼

肌肉、皮肤、血管

参考用量(mg

5 ~ 50

20 ~ 50

代表性实验结果

1. 用本试剂盒从30 mg小鼠肌肉组织中提取的RNANanodrop检测的结果

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由左图可知,用本试剂盒提取的RNA具有很好的纯度和较高的浓度。

右图:琼脂糖凝胶电泳检测的结果(取5 ul上样)。M: 250 bp DNA Ladder,Lane 1TRIzol(Invitrogen)方法提取的RNALane 2为本试剂盒提取的RNA。由图可知:本试剂盒提取RNA的得率明显高于TRIzol方法。

2. 本试剂盒用于提取lncRNAqPCR测试结果请见下图

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由上述qPCR的检测结果可见,本试剂盒能够很好的用于lncRNA的提取。



相关详细信息,请查看产品说明书。