产品简介
本产品基于苯酚/胍的样品裂解和二氧化硅膜纯化,可从动物组织和细胞中纯化高质量的总RNA(包含小片段RNA)。纯化后的总RNA适用于多种下游应用,包括:RT-PCR、RT-qPCR、RNA测序、RNA芯片等。
产品组分
组分 | EZB-miRN1 (50 Preps) |
Lysis Buffer | 30 ml |
Buffer A | 12 ml |
Wash Buffer 1*1 | 8 ml |
Wash Buffer 2*1 | 8 ml |
Elution Buffer | 10 ml |
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) | 50 preps |
注:*1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前须加入32 ml的无水乙醇并充分混匀,并在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。
保存条件
Lysis Buffer和Buffer A需2 ~ 8°C避光保存,其余组分室温保存(注:Buffer A在4°C保存时会出现结晶或冻结现象,仅需在使用前置于室温融化后使用即可,不影响使用)。有效期12个月。过期日期详见产品标签的有效期信息。
产品特点
1. 纯度高、完整性好:OD260/280和OD260/230都在1.9 ~ 2.2之间。完全适用于下游实验如RT-PCR、RT-qPCR、RNA测序、RNA芯片等实验。
2. 简单快速:25分钟快速提取高纯度的小片段RNA。
实验流程
注意事项
1. Wash Buffer 1和Wash Buffer 2首次使用前须加入32 ml的无水乙醇并充分混匀(Wash Buffer 1和Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4),并在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。
2. Elution Buffer使用前建议分装为3~4份保存,以防污染。
3. 本试剂盒可用于组织和细胞样品microRNA的提取。
4. 建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞,培养至细胞密度达到80%以上时进行miRNA提取,不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取miRNA,否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。
5. 本试剂盒中离心的过程都是在4°C的离心机中进行,其余的操作步骤都是在室温中进行,所以实验前需提前预冷离心机。
6. 样品裂解以后,如果不打算继续进行RNA提取,可将裂解产物转移到EP管中冻存在-80°C,下次解冻后恢复到室温使用,加Buffer A混匀,继续进行后续的步骤即可。
7. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上(如果洗脱液加到侧壁上,会导致miRNA没有被溶解而使产量大大减少),同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
8. 如果提取高脂肪含量组织(例如肝脏、脂肪)的miRNA,则建议使用货号为“EZB-RN001A”的RNA提取试剂盒,以获得更好的纯度。
代表性实验结果
1. 本试剂盒用于提取miRNA的qPCR测试结果请见下图
由上述qPCR的检测结果可见,本试剂盒能够很好的用于miRNA的提取。
相关详细信息,请查看产品说明书。