产品简介
本试剂盒采用Poly(A)加尾反应和cDNA合成反应同步进行的方法来进行microRNA第一链cDNA的合成，包含了与此配套的通用型qPCR反向引物（Universal 3’ qPCR Primer）和常用内参U6的qPCR正向引物（U6 Primer），仅需自行设计一条目的microRNA的特异性正向引物，就能够很好地用于microRNA的定量检测。具体过程是，先通过Poly(A) Polymerase在microRNA的3’末端加多聚Poly(A)尾，再使用Oligo(dT)-Universal Tag通用逆转录引物进行逆转录反应，最终生成microRNA的cDNA第一链。
本试剂盒为包含去除基因组DNA的高效DNase的快速逆转录试剂盒，主要含有5管试剂：gDNA Remover、miRNA RT Enzyme Mix、4× miRNA RT Buffer、Universal 3’ qPCR Primer和U6 Primer。其中，gDNA Remover中主要包括浓缩的DNase和Buffer，仅需室温（15 ~ 25°C）反应5 min，就能降解95%以上的基因组DNA，极大的降低了可能残留的基因组对结果的干扰。
miRNA RT Enzyme Mix中主要包含了Poly(A) Polymerase、逆转录酶、RNase Inhibitor。其中的Poly(A) Polymerase不但具有高效的加A尾效率，还可特异性识别成熟的单链miRNA，从而避免了具有双链结构的miRNA前体的逆转录反应；逆转录酶采用新型M-MLV突变体逆转录酶，具有很强的抗干扰能力及扩增能力，扩增效率优异。
4× miRNA RT Buffer包含了miRNA加A尾反应和逆转录反应的所有原料和引物，包括Oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物、Buffer和dNTPs，并经过精心优化，可保证miRNA 3’末端的Poly(A)修饰过程和逆转录过程同时高效进行。
产品组分
| 组分 | EZB-miRT2-plus-S (20 Rxns, 20 μl/Rxn) | EZB-miRT2-plus-L (50 Rxns, 20 μl/Rxn) |
gDNA Remover | 22 μl | 55 μl |
miRNA RT Enzyme Mix | 44 μl | 110 μl |
4× miRNA RT Buffer | 110 μl | 275 μl |
Universal 3’ qPCR Primer (10 μM) | 300 μl | 750 μl |
U6 Primer (10 μM) | 60 μl | 150 μl |
Nuclease free ddH2O | 1 ml | 1 ml |
保存条件
本产品所有组分置于-20°C保存。过期日期详见产品标签的有效期信息。
相关详细信息，请查看产品说明书。
