EZ-press Color Cell to cDNA Kit PLUS III (B0015C)

EZ-press Color Cell to cDNA Kit PLUS III (B0015C)

产品类型:Cell to cDNA 系列

货号:B0015C/B0015C-L/B0015C-XL

规格: 100/1000/4000 Rxns, 20 μl/Rxn

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产品简介

    本产品提供了一种简单快速的方法,无需RNA分离即可从培养细胞中获得cDNA。本产品得到的cDNA可在-80°C储存长达3个月且Ct值无明显变化,可很好的替代TRIzol法进行基因表达定量分析。与TRIzol法相比,本产品具有简单快速、稳定性高和灵敏度强等特点,从培养细胞到cDNA最快仅需25 min,最低检测下限为1000个细胞。

EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS III(货号:B0015)相比,本产品的4× Color CRT Mix含有蓝色惰性染料,它可与含有红色惰性染料的2× Color SYBR Green qPCR Master MixA0012A0012-R1A0012-R2)一起使用。在qPCR反应中,将本产品获得的蓝色cDNA2× Color SYBR Green qPCR Master Mix混合在一起,溶液会变成紫色。这在移液点板时提供了视觉辅助,降低了移液错误的风险。此外,染料不会影响qPCR反应的特异性或灵敏度。因此,建议将这两种试剂盒一起使用以获得最佳效果。

产品组分

组分

B0015C-S

(10 Rxns, 20μl/Rxn)

B0015C

(100 Rxns, 20μl/Rxn)

B0015C-L

(1000 Rxns, 20μl/Rxn)

B0015C-XL

(4000 Rxns, 20μl/Rxn)

Cell Lysis Buffer

1.1 ml 

5.5 ml 

5.5 ml × 10

(5.5 ml × 40)/Bag

gDNA   Remover

24 μl

240 μl

1.2 ml × 2

(1.2 ml × 8)/Bag

4× Color CRT Mix

55 μl

550 μl

2.75 ml × 2

(2.75 ml × 8)/Bag

ddH2O (Nuclease-)

1 ml

1 ml × 2

20 ml

(20 ml × 4)/Bag

保存条件

本产品的所有组分建议置于-20°C保存。过期日期详见产品标签中有效期信息

产品特点

1.  简单快速:只有2步(细胞裂解、逆转录),仅需25分钟左右即可得到cDNA

2.  基因组残留少:试剂盒中配有gDNA Remover试剂,室温处理5分钟,即可有效去除95%以上的残留基因组DNA

3.  所需样品少:最低可提取5000个细胞的RNA(对于更少的细胞数建议用B0011这个试剂盒),一般细胞数是5000 ~ 50万个细胞。

4.  节约成本:试剂盒所需的细胞数较少,所以大大节省血清和药物等试剂。

5.  安全无毒:不使用苯酚、氯仿、异丙醇、DEPC水等对身体有害的物质。

自备材料

水平摇床(可选)、RNase-free PCR管或八连管、RNase-free枪头和PCR仪等。

实验流程

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注意事项

1. 所有试剂使用前须混匀。本试剂安全无毒,建议在开放环境进行实验即可;如果在通风橱内操作,建议不要开风机,以免吹干细胞导致RNA严重降解。

2. 对于一些细胞体积与常见细胞(比如293T细胞)的体积差异极大的细胞种类,建议进行预实验,确定一个合适的裂解液比例后再进行正式实验。

3. 建议实验开始前,先解冻Cell Lysis Buffer,解冻后需颠倒几次使之充分混匀,然后放在室温备用,请勿涡旋振荡。

4. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服、一次性乳胶手套、一次性口罩、使用RNase-free耗材,避免RNase污染。

代表性实验结果

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由上图可见,EZ-press Color Cell to cDNA Kit PLUS III得到的cDNAqPCR结果与TRIzol方法高度一致。



关详细信息,请查看产品说明书。