EZ-press Color Cell to cDNA Kit PLUS III (B0015C)
产品类型:Cell to cDNA 系列
货号:B0015C/B0015C-L/B0015C-XL
规格: 100/1000/4000 Rxns, 20 μl/Rxn
价格: 询价
产品简介
本产品提供了一种简单快速的方法，无需RNA分离即可从培养细胞中获得cDNA。本产品得到的cDNA可在-80°C储存长达3个月且Ct值无明显变化，可很好的替代TRIzol法进行基因表达定量分析。与TRIzol法相比，本产品具有简单快速、稳定性高和灵敏度强等特点，从培养细胞到cDNA最快仅需25 min，最低检测下限为1000个细胞。
与EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS III（货号：B0015）相比，本产品的4× Color CRT Mix含有蓝色惰性染料，它可与含有红色惰性染料的2× Color SYBR Green qPCR Master Mix（A0012、A0012-R1、A0012-R2）一起使用。在qPCR反应中，将本产品获得的蓝色cDNA与2× Color SYBR Green qPCR Master Mix混合在一起，溶液会变成紫色。这在移液点板时提供了视觉辅助，降低了移液错误的风险。此外，染料不会影响qPCR反应的特异性或灵敏度。因此，建议将这两种试剂盒一起使用以获得最佳效果。
产品组分
| 组分 | B0015C-S (10 Rxns, 20μl/Rxn) | B0015C (100 Rxns, 20μl/Rxn) | B0015C-L (1000 Rxns, 20μl/Rxn) | B0015C-XL (4000 Rxns, 20μl/Rxn) |
Cell Lysis Buffer | 1.1 ml | 5.5 ml | 5.5 ml × 10 | (5.5 ml × 40)/Bag |
gDNA Remover | 24 μl | 240 μl | 1.2 ml × 2 | (1.2 ml × 8)/Bag |
4× Color CRT Mix | 55 μl | 550 μl | 2.75 ml × 2 | (2.75 ml × 8)/Bag |
ddH2O (Nuclease-) | 1 ml | 1 ml × 2 | 20 ml | (20 ml × 4)/Bag |
保存条件
本产品的所有组分建议置于-20°C保存。过期日期详见产品标签中有效期信息。
产品特点
1. 简单快速：只有2步（细胞裂解、逆转录），仅需25分钟左右即可得到cDNA。
2. 基因组残留少：试剂盒中配有gDNA Remover试剂，室温处理5分钟，即可有效去除95%以上的残留基因组DNA。
3. 所需样品少：最低可提取5000个细胞的RNA（对于更少的细胞数建议用B0011这个试剂盒），一般细胞数是5000 ~ 50万个细胞。
4. 节约成本：试剂盒所需的细胞数较少，所以大大节省血清和药物等试剂。
5. 安全无毒：不使用苯酚、氯仿、异丙醇、DEPC水等对身体有害的物质。
自备材料
水平摇床（可选）、RNase-free PCR管或八连管、RNase-free枪头和PCR仪等。
实验流程
注意事项
1. 所有试剂使用前须混匀。本试剂安全无毒，建议在开放环境进行实验即可；如果在通风橱内操作，建议不要开风机，以免吹干细胞导致RNA严重降解。
2. 对于一些细胞体积与常见细胞（比如293T细胞）的体积差异极大的细胞种类，建议进行预实验，确定一个合适的裂解液比例后再进行正式实验。
3. 建议实验开始前，先解冻Cell Lysis Buffer，解冻后需颠倒几次使之充分混匀，然后放在室温备用，请勿涡旋振荡。
4. 为了您的安全和健康，请穿戴实验服、一次性乳胶手套、一次性口罩、使用RNase-free耗材，避免RNase污染。
代表性实验结果
由上图可见，EZ-press Color Cell to cDNA Kit PLUS III得到的cDNA的qPCR结果与TRIzol方法高度一致。
相关详细信息，请查看产品说明书。
