产品简介
本试剂盒是一款借助ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内ATP含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目的试剂盒。试剂盒中的ATP Detection Reagent为即用型，含有热稳定的荧光素酶（luciferase）和高纯度的荧光素（luciferin），无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液，直接在细胞培养物中加入本试剂使细胞裂解，释放出ATP，即可发生如下图1（试剂盒原理概述）所示的反应。发光强度与ATP的量在一定范围内成正比。本试剂性能优异，具有线性相关性好、特异性高、信号半衰期长等特点。同时具有高度的稳定性，能够在4°C稳定保存1周以上同时活性不低于在-20°C保存的85%。
产品组分
组分 |
EZB-CV1-S (100 assays, 100 μl/assay) |
EZB-CV1 (1000 assays, 100 μl/assay) |
EZB-CV1-L (5000 assays, 100 μl/assay) |
ATP Detection Reagent | 10 ml | 100 ml | 500 ml |
注：对于10 ml ATP Detection Reagent：足以在96孔板中进行100次assays，每次assay用100 µl；或384孔板中进行400次assays，每次assay用25 µl。
保存条件
本产品-20°C避光可保存6个月，-80°C避光可保存12个月以上。过期日期详见产品标签中有效期信息。为了获得最大的光信号，我们建议在-80°C下长期避光保存。该试剂可稳定进行10次冻融循环，活性损失小于10%。
自备材料
具有发光检测模块的酶标仪、适合于发光检测的标准不透明壁多孔板（贴壁处理的无菌板）、多孔板振板装置、单通道或者多通道移液器、水浴锅。
代表性实验结果
图2. 细胞数目与发光的线性关系。使用含有10% FBS的DMEM培养基连续2倍倍比稀释A549细胞，制备不同密度的细胞悬液。每种密度的细胞悬液取100 μl加入96孔酶标板中，分别加入100 μl的ATP Detection Reagent，振荡混匀，静置10 min后检测发光。结果表明，本试剂在宽广的范围内具有良好的线性关系。
图3. 试剂在4°C放置不同时间的稳定性检测。平衡至室温后，向10000个细胞（含100 μl培养基）中加入放置不同时间长度的ATP Detection Reagent（100 μl），振荡混匀，静置10 min后检测发光。结果表明，本试剂在4°C的保存条件下具有较高的稳定性。
图4. 荧光信号稳定性检测。向5000个细胞（含100 μl培养基）中加入ATP Detection Reagent（100 μl），振荡混匀，静置0、10、20、30、40、50、60 min后分别检测发光。结果表明，本试剂荧光信号稳定，能够满足绝大多数的实验需求。
相关详细信息，请查看产品说明书。
