产品简介
本产品提供了一种简单、快速、可靠的方法，用于从多种来源的动物细胞分离纯化高质量的总RNA，无需使用苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒物质。纯化后的总RNA适用于多种下游应用，包括：RT-PCR、RT-qPCR等。
产品组分
组分 | B0004DP (100 Preps) |
Lysis Buffer | 55 ml |
Wash Buffer*1 | 13 ml |
Elution Buffer | 10 ml |
gDNA Remover | 220 μl |
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) | 100 Preps |
注:*1. Wash Buffer首次使用前，请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀。
保存条件
gDNA Remover置于-20°C保存；其余组分室温保存。有效期12个月。过期日期详见产品标签中的有效期信息。
产品特点
1、简单快速：可在~8分钟内获取高质量RNA。
2、安全无毒：无需苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒试剂，无需乙醇沉淀。
3、纯度高：提取的RNA可用于多种下游实验，如RT-PCR、RT-qPCR等。
实验流程
注意事项
1. Wash Buffer首次使用前须加入52 ml的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer与无水乙醇的体积比为1:4），加好混匀后在瓶身做好标记。
2. 建议把Elution Buffer分装为3 ~ 4份，以减小污染的概率。
3. RNA提取须在室温进行，提取过程中不可置于冰上。
4. 建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞，培养至细胞密度达到80%以上时进行RNA提取，不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA，否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。
5. 样品裂解时为了防止吹打过程中产生过多的气泡，可在加入裂解液后将移液器量程调至450 μl，吹打30下左右（吹时，液体不要完全吹出，枪头内可以留一点；吸时，液体也不要完全吸完，防止吸入气泡），使细胞充分裂解【裂解充分以后，如果不打算继续进行RNA提取，可将裂解产物转移到EP管中直接冻存在-80°C，下次解冻后恢复到室温使用，加无水乙醇混匀后继续进行后续的操作即可】。
6. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上（如果洗脱液加到侧壁上，会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少），同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
代表性实验结果
1. 本产品与TRIzol (Invitrogen)方法的对比测试：检测A549细胞中4个不同基因的mRNA表达水平
实验结果表明：使用本产品得到了优异的结果，比TRIzol法得到的结果更好，两组结果的相关系数可达R2=0.9898。结论：本产品能够很好地替代TRIzol方法进行细胞RNA的提取及逆转录，得到的结果优于TRIzol方法。
相关详细信息，请查看产品说明书。
