产品简介
EZ-Press 96 Tissue RNA Purification Kit可用于96个或192个组织样品(不超过30 mg)的RNA提取。EZ-Press 96 Tissue RNA Purification Kit为药物筛选、治疗监测和基础研究等领域的研究提供了高效、高通量的RNA样品制备解决方案。
本试剂盒取代了目前耗时、复杂的方法,包括乙醇沉淀、大量洗涤步骤或使用苯酚等有毒物质。纯化的RNA可用于多种下游应用,包括:cDNA合成、RT-PCR、RT-qPCR,Northern、dot和slot blot分析等,以及引物延伸、RNase/S1核酸酶保护和基因芯片检测等。此外,EZ-Press 96 Tissue RNA Purification Kit可用于纯化来自酶促反应的RNA,例如:DNA酶消化、蛋白酶消化、RNA连接或标记反应等。
产品组分
组分 | EZ4004-S (2 × 96 Preps) | EZ4004-L (12 × 96 Preps) |
96-Well RNA Plates*1 | 2 | 12 |
Caps for Elution Plates*1 | 2 | 12 |
Micro-pore Tape Sheets*1 | 4 | 24 |
96-Well Collection Plates (Square Hole) *1 | 4 | 24 |
96-Well Elution Plates (Round Hole) *1 | 1 × 2 | 1 × 12 |
Lysis Buffer | 110 ml | 220 ml × 3 |
Wash Buffer 1*2 | 70 ml × 2 | 240 ml × 4 |
Wash Buffer 2*2 | 30 ml | 90 ml × 2 |
Elution Buffer*3 | 30 ml | 100 ml × 2 |
注:*1. 为简化叙述,这5种装置在本文中的简称依次为:RNA提取孔板、孔板盖、透气封板膜/封板膜、收集孔板、洗脱孔板;*2. 首次使用Wash Buffer 1和Wash Buffer 2前,每瓶须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇(Wash Buffer 1与无水乙醇的体积比为1:1,Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4),充分混匀后才可使用;*3. 本试剂盒中的Elution Buffer为Nuclease-free ddH2O。
保存条件
Lysis Buffer置于4°C避光保存,其余组分室温(15 ~ 25°C)保存,可稳定保存12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
自备材料
带深孔板专用的水平离心转头、且转速不低于2100 g的台式离心机,无水乙醇,氯仿(氯仿替代物)和水平摇床等。
实验流程
注意事项
1. 首次使用Wash Buffer 1和Wash Buffer 2前,每瓶须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇(Wash Buffer 1与无水乙醇的体积比为1:1,Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4),充分混匀后才可使用。
2. 关于离心操作:所有的孔板离心操作,均需要将96-Well RNA Plates(以下简称为:RNA提取孔板)根据需要置于96-Well Collection Plates(以下简称为:收集孔板)上或96-Well Elution Plates(以下简称为:洗脱孔板)上,加完液体后、离心前需在RNA提取孔板上盖上Micro-pore Tape Sheet(以下简称为:透气封板膜/封板膜)。收集孔板在清洗阶段需重复使用,洗脱阶段换用洗脱孔板。
3. 本试剂盒中加入氯仿后的离心操作需在4°C进行,实验前需提前预冷离心机;其余的操作步骤在室温进行。
4. 每个样品的组织用量建议为5 ~ 30 mg。
5. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服、一次性乳胶手套和一次性口罩。
代表性实验结果
1. 使用本试剂盒提取心(20 mg)、肺(20 mg)、肝(10 mg)和肾(10 mg)样品,各2个重复。所得的总RNA使用Nanodrop检测的结果如下表:
样品 | 浓度(ng/µl) | 260/280 | 260/230 |
心 | 276.9 | 2.01 | 1.94 |
296.6 | 2.00 | 1.93 |
肺 | 481.2 | 1.99 | 1.90 |
504.5 | 1.98 | 1.96 |
肝 | 1056.6 | 2.01 | 1.92 |
1254.5 | 2.03 | 1.94 |
肾 | 464.4 | 1.99 | 1.89 |
527.1 | 1.97 | 1.97 |
2. 琼脂糖凝胶电泳。电泳条件:上样量为10 μl,琼脂糖凝胶浓度为1%,电泳电压180 V,电泳时间18 min。marker:DL5000 DNA marker;Lanes 2 ~ 9分别为心、肺、肝和肾样品获得的RNA。
相关详细信息,请查看产品说明书。