产品简介
本产品是从2 × 104 ~ 5 × 105个人类或动物细胞中同时分离96个或192个RNA样品的一款理想的试剂盒。 本产品为药物筛选、治疗监测和基础研究等领域的研究提供了高效、高通量的RNA样品制备解决方案。在不到1 h的时间内,当并行处理2个96孔RNA板时,可以获得多达192个高纯度RNA样品(每个RNA样品约需20 sec)。
本产品取代了目前耗时、复杂的方法,包括乙醇沉淀、大量洗涤步骤或使用苯酚、氯仿等有毒物质。纯化的RNA可用于多种下游应用,包括:cDNA合成、RT-PCR、RT-qPCR,Northern、dot和slot blot分析等,以及引物延伸、RNase/S1核酸酶保护和基因芯片检测等。此外,本产品可用于纯化来自酶促反应的RNA,例如:DNA酶消化、蛋白酶消化、RNA连接或标记反应等。
产品组分
组分 | EZ4002-S (2 × 96 Preps) | EZ4002-L (12 × 96 Preps) |
gDNA Removing 96 Plates*1 | 2 | 12 |
96-Well RNA Plates*1 | 2 | 12 |
Micro-pore Tape Sheets*1 | 6 | 36 |
Caps for Elution Plates*1 | 2 | 12 |
96-Well Collection Plates (Square Hole) *1 | 4 | 12 × 2 |
96-Well Elution Plates (Round Hole) *1 | 2 | 12 |
Buffer RLB | 40 ml | 240 ml |
Buffer RW1*2 | 70 ml | 210 ml × 2 |
Buffer RW2*2 | 30 ml | 90 ml × 2 |
Elution Buffer*3 | 30 ml | 100 ml × 2 |
注:*1. 为简化叙述,这6种装置在本文中的简称依次为:DNA清除孔板、RNA提取孔板、透气封板膜/封板膜、孔板盖、收集孔板和洗脱孔板;*2. 首次使用Buffer RW1和Buffer RW2前,每瓶须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇(Buffer RW1与无水乙醇的体积比为1:1,Buffer RW2与无水乙醇的体积比为1:4),充分混匀后才可使用;*3. 本试剂盒中的Elution Buffer为Nuclease-free ddH2O。
保存条件
本产品中的gDNA Removing 96 Plates需保存在2 ~ 8°C,其余所有组分保存在室温,可稳定保存12个月。过期日期详见产品标签的有效期信息。
自备材料
带深孔板专用的水平离心转头、且转速不低于2100 g的台式离心机,无水乙醇和水平摇床等。
实验流程
注意事项
1. 首次使用Buffer RW1和Buffer RW2前,每瓶须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇(Buffer RW1与无水乙醇的体积比为1:1,Buffer RW2与无水乙醇的体积比为1:4),充分混匀后才可使用。
2. 关于离心操作:在进行DNA去除步骤时,需要将gDNA Removing 96 Plates (以下简称为:DNA清除孔板)置于96-Well Collection Plates(以下简称为:收集孔板)上,加完液体后离心前在DNA清除孔板上盖上Micro-pore Tape Sheet(以下简称为:透气封板膜/封板膜);在进行RNA提取纯化步骤时,需要将96-Well RNA Plates(以下简称为:RNA提取孔板)置于收集孔板上,加完液体后离心前在RNA提取孔板上盖上透气封板膜;在进行RNA洗脱步骤时,需要将RNA提取孔板置于96-Well Elution Plates(以下简称为:洗脱孔板)上,加完液体后、离心前需在RNA提取孔板上盖上透气封板膜。收集孔板在清洗阶段需重复使用,洗脱阶段换用洗脱孔板。
3. 每个样品的细胞数建议范围为2 × 104 ~ 5 × 105。
4. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服、一次性乳胶手套和一次性口罩。
代表性实验结果
1. 使用本试剂盒提取40万细胞量的293T细胞样品,所得的总RNA使用Nanodrop检测的结果如下
样品 | 浓度(ng/µl) | 260/280 | 260/230 |
1 | 184.4 | 2.03 | 2.00 |
2 | 189.7 | 2.01 | 2.03 |
3 | 177.2 | 2.02 | 2.04 |
2. 琼脂糖凝胶电泳结果如下图所示:
由凝胶电泳结果可见,提取得到的RNA具有较高的完整性,且无明显基因组DNA残留。表明用本试剂盒提取得到的总RNA具有较高的浓度、纯度和完整性,且无基因组残留。
相关详细信息,请查看产品说明书。