产品简介
本产品是从2 × 104 ~ 5 × 105个人类或动物细胞中同时分离96个或192个RNA样品的理想试剂盒，为药物筛选、治疗监测和基础研究等领域的研究提供了高效、高通量的RNA样品制备解决方案。在不到1 h的时间内，当并行处理2个96孔RNA板时，可以获得多达192个高纯度RNA样品（每个RNA样品约需20 sec）。
本产品取代了目前耗时、复杂的方法，包括乙醇沉淀、大量洗涤步骤或使用苯酚、氯仿等有毒物质。纯化的RNA可用于多种下游应用，包括：cDNA合成、RT-PCR、RT-qPCR，Northern、dot和slot blot分析等，以及引物延伸、RNase/S1核酸酶保护和基因芯片检测等。此外，本产品可用于纯化来自酶促反应的RNA，例如：DNA酶消化、蛋白酶消化、RNA连接或标记反应等。
产品组分
组分 | EZ4001-S (2 × 96 Preps) | EZ4001-L (12 × 96 Preps) |
96-Well RNA Plates*1 | 2 | 12 |
Caps for Elution Plates*1 | 2 | 12 |
Micro-pore Tape Sheets*1 | 4 | 24 |
96-Well Collection Plates (Square Hole) *1 | 2 | 12 |
96-Well Elution Plates (Round Hole) *1 | 2 | 12 |
Buffer RLB | 80 ml | 240 ml × 2 |
Buffer RW1*2 | 70 ml | 210 ml × 3 |
Buffer RW2*2 | 30 ml | 90 ml × 3 |
Elution Buffer*3 | 30 ml | 30 ml × 8 |
注：*1. 为简化叙述，这5种装置在本文中的简称依次为：RNA提取孔板、孔板盖、透气封板膜/封板膜、收集孔板、洗脱孔板；*2. 首次使用Buffer RW1和Buffer RW2前，每瓶须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇（Buffer RW1与无水乙醇的体积比为1:1，Buffer RW2与无水乙醇的体积比为1:4），充分混匀后才可使用；*3. 本试剂盒中的Elution Buffer为Nuclease-free ddH2O。
保存条件
本产品所有组分置于室温保存，可稳定保存12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
自备材料
带深孔板专用的水平离心转头、且转速不低于2100 g的台式离心机，无水乙醇和水平摇床等。
实验流程
注意事项
1. 首次使用Buffer RW1和Buffer RW2前，每瓶须加入瓶身标签所示体积的无水乙醇（Buffer RW1与无水乙醇的体积比为1:1，Buffer RW2与无水乙醇的体积比为1:4），充分混匀后才可使用。
2. 关于离心操作：所有的孔板离心操作，均需要将96-Well RNA Plates（以下简称为：RNA提取孔板）根据需要置于96-Well Collection Plates（以下简称为：收集孔板）上或96-Well Elution Plates（以下简称为：洗脱孔板）上，加完液体后、离心前需在RNA提取孔板上盖上Micro-pore Tape Sheet（以下简称为：透气封板膜/封板膜）。收集孔板在清洗阶段需重复使用，洗脱阶段换用洗脱孔板。
3. 每个样品的细胞数建议范围为2 × 104 ~ 5 × 105。
4. 为了您的安全和健康，请穿戴实验服、一次性乳胶手套和一次性口罩。
5. 本试剂盒提取得到的总RNA，可能会残留极少量的基因组DNA，对于后续的逆转录和qPCR不会造成显著的影响（尤其当逆转录步骤中含有去除基因组DNA的流程，或qPCR引物为跨内含子设计时）；对于部分对基因组DNA残留极为敏感的实验，推荐使用EZ4002试剂盒（含有专用的基因组DNA清除孔板，能够有效的去除基因组DNA）。
代表性实验结果
使用本试剂盒提取5 × 104 ~ 2 × 105的293T细胞样品，所得的总RNA使用Nanodrop检测的结果如下表：
细胞数 | 浓度（ng/µl） | OD260 | OD280 | 260/280 | 260/230 |
2 × 105 | 113.1 | 2.828 | 1.385 | 2.04 | 2.16 |
1 × 105 | 46.2 | 1.154 | 0.559 | 2.07 | 2.06 |
5 × 104 | 18.8 | 0.469 | 0.230 | 2.04 | 1.81 |
由上述表格可见，本试剂盒能够提取得到相对高浓度和高纯度的总RNA，在细胞数不低于5 × 104个细胞时，均能得到较好的OD比值。5 × 104个293T细胞得到的总RNA大约为600 ng ~ 1 µg。
相关详细信息，请查看产品说明书。
